| 出品公司: | Microbix Biosystems INC |
|---|---|
| 载体名称: | pDC315 |
| 质粒类型: | 哺乳动物细胞腺病毒表达载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 低拷贝 |
| 启动子: | MCMV |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 3913 bp |
| 5' 测序引物及序列: | pDC315F: acg tgg gta taa gag gcg |
| 3' 测序引物及序列: | pDC315R: cga tgc tag acg atc cag |
| 载体标签: | -- |
| 载体抗性: | 氨苄 |
| 备注: | pDC315 是一种真核表达质粒载体，将目的基因插入多克隆位点，转染细胞即可进行表达。带有目的基因的pDC315 可以通过插入位点两侧的酶切位点以及目的基因内部的特异酶切位点进行鉴定。 |
| 产品目录号: | PD-01-27 |
| 稳定性: | / |
| 组成型: | -- |
| 病毒/非病毒: | 腺病毒 |
- BioVector NTCC典型培养物保藏中心
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载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息
主要元件位置：
2~102: ITR
469~991: MCMV promoter (short)
1029~1188: SV40 polyA
1190~1223: loxP
1603~1903: ori
2353~3169: amp
3454~453: Ad element
3823~1: ITR
主要酶切位点：
Xba I：455
EcoR I：994
Nhe I：1005
BamH I：1013
Sal I：1024
Acc I：1025
载体简介
pDC315 含有以下元件：
1． Ampr: 为质粒在E.coli（如DH5α）中扩增提供氨苄抗性（终浓度100μg/ml）。
2． ori：质粒在E.coli 中的复制起点。
3． Ad：Ad 序列，主要由Ad 可以与Ad 基因组质粒发生同源重组。
4． ITR：Ad 反向末端重复序列，是Ad 基因组的包装识别信号。
5． MCMV：来自小鼠CMV 病毒的启动子。
6． SV40 polyA：来自SV40 病毒T 抗原的mRNA 加尾信号。
7． loxP：真核重组酶（Cre）的重组识别序列。
通过pDC315 构建重组腺病毒的用户须知
1． 用户需向Microbix Biosystems, Inc.公司购买pDC315 质粒，并与Microbix Biosystems, Inc.公司签订MTA。
2． 为了确保病毒包装的目的基因能够正确表达，用户需对自己构建的带有目的基因的pDC315 进行酶切鉴定，并建议进行测序验证，保证克隆的基因正确。
3． 由于pDC315 本身是一种真核表达载体，转染细胞即可介导目的基因的表达，因此建议有条件的用户在完成质粒构建后，将其转染细胞，通过ELISA、免疫组化或Western 的方法来检测目的基因的表达，以及检测目的基因表达后的生理活性。这样可以进一步增加实验成功的把握。
载体序列
LOCUS pDC315 3913 bp dsDNA Circular
DEFINITION Puc based lox HCMV shuttle plasmid for Cre-based Ad vector rescue Cummings & Graham, unpublished
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COMMENT VNTREPLTYPE|Plasmid|
COMMENT VNTEXTCHREPL|Bacteria|
COMMENT This file is created by Vector NTI
http://www.biovector.net/
COMMENT VNTAUTHORNAME|biovector.net|
FEATURES Location/Qualifiers
promoter 469..991
/note="MCMV promoter - Short"
/label=MCMV
misc_feature 1190..1223
/label=loxP
polyA_signal 1029..1188
/label=SV40\PolyA
rep_origin 1603..1903
/label=ori
CDS complement(2353..3169)
/label=amp
misc_feature 3454..453
/label=Ad
CDS 3823..1
/label=ITR
CDS complement(2..102)
/label=ITR
ORIGIN
1 ttcatcaata atatacctta ttttggattg aagccaatat gataatgagg gggtggagtt
61 tgtgacgtgg cgcggggcgt gggaacgggg cgggtgacgt agtagtgtgg cggaagtgtg
121 atgttgcaag tgtggcggaa cacatgtaag cgacggatgt ggcaaaagtg acgtttttgg
181 tgtgcgccgg tgtacacagg aagtgacaat tttcgcgcgg ttttaggcgg atgttgtagt
241 aaatttgggc gtaaccgagt aagatttggc cattttcgcg ggaaaactga ataagaggaa
301 gtgaaatctg aataattttg tgttactcat agcgcgtaat atttgtctag ggccgcgggg
361 actttgaccg tttacgtgga gactcgccca ggtgtttttc tcaggtgttt tccgcgttcc
421 gggtcaaagt tggcgtttta ttattatagt cagntctaga gatatactga gtcattaggg
481 actttccaat gggttttgcc cagtacataa ggtcaatagg ggtgaatcaa caggaaagtc
541 ccattggagc caagtacact gagtcaatag ggactttcca ttgggttttg cccagtacaa
601 aaggtcaata gggggtgagt caatgggttt ttcccattat tggcacgtac ataaggtcaa
661 taggggtgag tcattgggtt tttccagcca tttaattaaa acgccatgta ctttcccacc
721 attgacgtca atgggctatt gaaactaatg caacgtgacc tttaaacggt actttcccat
781 agctgattaa tgggaaagta ccgttctcga gccaatacac gtcaatggga agtgaaaggg
841 cagccaaaac gtaacaccgc cccggttttc ccctggaaat tccatattgg cactcattct
901 attggctgag ctgcgttcta cgtgggtata agaggcgcga ccagcgtcgg taccgtcgca
961 gtcttcggtc tgaccaccgt agaacgcaga tcgaattcaa gctgctagca aggatccagc
1021 ttgtcgactt cgagcaactt gtttattgca gcttataatg gttacaaata aagcaatagc
1081 atcacaaatt tcacaaataa agcatttttt tcactgcatt ctagttgtgg tttgtccaaa
1141 ctcatcaatg tatcttatca tgtctggatc gtctagcatc gaagatccaa taacttcgta
1201 tagcatacat tatacgaagt tataagtagc ttggcgtaat catggtcata gctgtttcct
1261 gtgtgaaatt gttatccgct cacaattcca cacaacatac gagccggaag cataaagtgt
1321 aaagcctggg gtgcctaatg agtgagctaa ctcacattaa ttgcgttgcg ctcactgccc
1381 gctttccagt cgggaaacct gtcgtgccag ctgcattaat gaatcggcca acgcgcgggg
1441 agaggcggtt tgcgtattgg gcgctcttcc gcttcctcgc tcactgactc gctgcgctcg
1501 gtcgttcggc tgcggcgagc ggtatcagct cactcaaagg cggtaatacg gttatccaca
1561 gaatcagggg ataacgcagg aaagaacatg tgagcaaaag gccagcaaaa ggccaggaac
1621 cgtaaaaagg ccgcgttgct ggcgtttttc cataggctcc gcccccctga cgagcatcac
1681 aaaaatcgac gctcaagtca gaggtggcga aacccgacag gactataaag ataccaggcg
1741 tttccccctg gaagctccct cgtgcgctct cctgttccga ccctgccgct taccggatac
1801 ctgtccgcct ttctcccttc gggaagcgtg gcgctttctc aatgctcacg ctgtaggtat
1861 ctcagttcgg tgtaggtcgt tcgctccaag ctgggctgtg tgcacgaacc ccccgttcag
1921 cccgaccgct gcgccttatc cggtaactat cgtcttgagt ccaacccggt aagacacgac
1981 ttatcgccac tggcagcagc cactggtaac aggattagca gagcgaggta tgtaggcggt
2041 gctacagagt tcttgaagtg gtggcctaac tacggctaca ctagaaggac agtatttggt
2101 atctgcgctc tgctgaagcc agttaccttc ggaaaaagag ttggtagctc ttgatccggc
2161 aaacaaacca ccgctggtag cggtggtttt tttgtttgca agcagcagat tacgcgcaga
2221 aaaaaaggat ctcaagaaga tcctttgatc ttttctacgg ggtctgacgc tcagtggaac
2281 gaaaactcac gttaagggat tttggtcatg agattatcaa aaaggatctt cacctagatc
2341 cttttaaatt aaaaatgaag ttttaaatca atctaaagta tatatgagta aacttggtct
2401 gacagttacc aatgcttaat cagtgaggca cctatctcag cgatctgtct atttcgttca
2461 tccatagttg cctgactccc cgtcgtgtag ataactacga tacgggaggg cttaccatct
2521 ggccccagtg ctgcaatgat accgcgagac ccacgctcac cggctccaga tttatcagca
2581 ataaaccagc cagccggaag ggccgagcgc agaagtggtc ctgcaacttt atccgcctcc
2641 atccagtcta ttaattgttg ccgggaagct agagtaagta gttcgccagt taatagtttg
2701 cgcaacgttg ttgccattgc tacaggcatc gtggtgtcac gctcgtcgtt tggtatggct
2761 tcattcagct ccggttccca acgatcaagg cgagttacat gatcccccat gttgtgcaaa
2821 aaagcggtta gctccttcgg tcctccgatc gttgtcagaa gtaagttggc cgcagtgtta
2881 tcactcatgg ttatggcagc actgcataat tctcttactg tcatgccatc cgtaagatgc
2941 ttttctgtga ctggtgagta ctcaaccaag tcattctgag aatagtgtat gcggcgaccg
3001 agttgctctt gcccggcgtc aacacgggat aataccgcgc cacatagcag aactttaaaa
3061 gtgctcatca ttggaaaacg ttcttcgggg cgaaaactct caaggatctt accgctgttg
3121 agatccagtt cgatgtaacc cactcgtgca cccaactgat cttcagcatc ttttactttc
3181 accagcgttt ctgggtgagc aaaaacagga aggcaaaatg ccgcaaaaaa gggaataagg
3241 gcgacacgga aatgttgaat actcatactc ttcctttttc aatattattg aagcatttat
3301 cagggttatt gtctcatgag cggatacata tttgaatgta tttagaaaaa taaacaaata
3361 ggggttccgc gcacatttcc ccgaaaagtg ccacctgacg tctaagaaac cattattatc
3421 atgacattaa cctataaaaa taggcgtatc actctaggca aaatagcacc ctcccgctcc
3481 agaacaacat acagcgcttc acagcggcag cctaacagtc agccttacca gtaaaaaaga
3541 aaacctatta aaaaaacacc actcgacacg gcaccagctc aatcagtcac agtgtaaaaa
3601 agggccaagt gcagagcgag tatatatagg actaaaaaat gacgtaacgg ttaaagtcca
3661 caaaaaacac ccagaaaacc gcacgcgaac ctacgcccag aaacgaaagc caaaaaaccc
3721 acaacttcct caaatcgtca cttccgtttt cccacgttac gtaacttccc attttaagaa
3781 aactacaatt cccaacacat acaagttact ccgccctaaa acctacgtca cccgccccgt
3841 tcccacgccc cgcgccacgt cacaaactcc accccctcat tatcatattg gcttcaatcc
3901 aaaataaggt ata
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载体应用举例
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