bmc-7 牛外周血单核巨噬细胞 BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

bmc-7 牛外周血单核巨噬细胞

一种分离牛外周血单核细胞的方法，其特征在于，包括步骤：1)向含有抗凝剂ACD-A的离心管中加入采集到的牛外周血，制成抗凝血液；2)将OptiPi^p™原液与C液按比例混合，制成密度分离液；3)将1)的抗凝血液与PBS溶液按比例混合，制成稀释的抗凝血液；4)将2份体积的3)稀释的抗凝血液加在1份体积的2)的密度分离液之上，离心，弃上清，将分离液和血清液面交界处的白色薄层转移至另一离心管中；5)向4)的离心管中加入PBS溶液清洗细胞，然后以转速250g离心5-lOmin ；6)向5)的细胞沉淀中加入PBS溶液重悬，即得单个核细胞；其中，2)中所述的C液的制备方法为：将1.79g Tricine Buffer加入IOOml水中，制得 IOOmM Tricine 储存液，4°C保存；将 0. 85g NaCl 加入 50ml 水中，加入 20ml IOOmM Tricine 储存液，用IM NaOH调节pH值7. 4，加水补充体积至100ml，0. 22 μ m滤器过滤除菌。

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