BioVector® MUTZ-8 细胞株（人急性粒-单核细胞白血病细胞） / BioVector® MUTZ-8 Cell Line (Human Acute Myelomonocytic Leukemia Cell Line)

一、 背景与来源说明 / Background & Origin

BioVector® MUTZ-8 是一种建立自一名63岁患有继发性急性粒-单核细胞白血病（Acute Myelomonocytic Leukemia, AML FAB-M4）女性患者外周血的人源白血病细胞株。该患者在出现骨髓增生异常综合征（MDS）25年后演变为急性白血病。

MUTZ-8 细胞株具有显著的遗传学与生物学特征：

1. 细胞因子严格依赖性：高度依赖 GM-CSF 或相关细胞因子（如 IL-3、SCF）维持体外生存与增殖。

2. 关键基因突变与染色体变异：携带经典的 JAK2 V617F 纯合突变 以及 TP53 突变，并伴有 5q31 缺失及 $\text{t}(5;11)(\text{q21};\text{q10})$ 非相互易位等复杂染色体核型变异。

该细胞株是研究 MDS 向 AML 转化的演进机制、JAK2/STAT 信号通路调控、5q- 综合征白血病发生学以及细胞因子依赖性抗肿瘤靶向药筛选的重要体外模型。

二、 细胞生物学特征 / Biological Characteristics

• 物种与来源 / Taxonomy & Source：人（Homo sapiens），外周血（继发性急性粒-单核细胞白血病 AML M4 / MDS 转化型）

• 生物安全等级 / Biosafety Level：BSL-1（或根据人源细胞规范按 BSL-2 防护）

• 生长特性 / Growth Properties：悬浮生长（Suspension），细胞呈圆形或多形性，多为单生，偶见小聚集簇及巨细胞

• 细胞因子依赖性 / Cytokine Dependency：重度依赖 GM-CSF（或 IL-3 / 5637 细胞条件培养基）维持生长

• 基因突变与染色体表型 / Genetic Features：

  • 突变类型：$JAK2^{\text{V617F}}$ 突变、 $TP53$ 突变

  • 染色体异常：5q31 缺失、$\text{t}(5;11)(\text{q21};\text{q10})$ 易位

• 表面表型与标记物 / Surface Markers & Expression：

  • 髓系及单核系标记：CD13(+)、CD15(+)、CD33(+)、HLA-DR(+)、CD34(+)

  • 阴性标记：CD3(-)、CD4(-)、CD14(-)、CD19(-)（B/T淋系与成熟单核标记阴性）

• 主要应用 / Key Applications：MDS/AML 发病机制研究、JAK2 V617F 激酶抑制剂筛选、5q- 基因片段功能分析、造血细胞因子信号传导

三、 培养条件与传代指南 / Culture & Handling Protocols

1. 推荐培养基 / Complete Growth Medium

• 基础培养基：BioVector® $\alpha$-MEM Medium（含核苷与脱氧核苷） 或 BioVector® RPMI-1640 Medium

• 血清浓度：20% 灭活 BioVector® Fetal Bovine Serum (FBS) + 1% 双抗（Penicillin-Streptomycin）

• 必需细胞因子 / Vital Supplement：必须添加重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 rhGM-CSF (10 ng/mL)（或 10% 5637 细胞条件培养基）。缺乏细胞因子或接种密度过低会导致快速凋亡或诱导因子不依赖性突变株的生长。

• 培养环境：37 摄氏度，5% $\text{CO}_2$，高湿度培养箱

2. 复苏与传代操作 / Thawing & Subculture

1. 复苏：将冻存管快速置于 37 摄氏度水浴中融化（1–2 分钟）。加入 8–10 mL 预热并补充有 rhGM-CSF 的 BioVector® Complete Medium，120 x g 离心 5 分钟，弃上清后重悬接种。初复苏时建议接种密度稍高（约 $0.8 \times 10^6 \text{ cells/mL}$）以协助恢复。

2. 传代与密度控制：

   • 维持密度：建议维持细胞密度在 $5 \times 10^5 \text{ cells/mL}$ 至 $1.0 \times 10^6 \text{ cells/mL}$ 之间（最高密度约 $1.2 \times 10^6 \text{ cells/mL}$）。

   • 换液传代：每周按 1:2 的比例分瓶或补液传代 1–2 次。无需 Trypsin 消化。倍增时间约为 3–5 天。

3. 冻存保存 / Cryopreservation

• 冻存液配方：80% BioVector® FBS + 10% DMSO + 10 ng/mL rhGM-CSF（或直接使用专用完全冻存液）

• 保存条件：程序降温后保存于液氮（-196 摄氏度）。

四、 技术指标简表 / Technical Data Summary

BioVector® MUTZ-8 细胞株（人急性粒-单核细胞白血病细胞） / BioVector® MUTZ-8 Cell Line (Human Acute Myelomonocytic Leukemia Cell Line)

1. Background and Origin

BioVector® MUTZ-8 is a human leukemic cell line established from the peripheral blood of a 63-year-old female patient with secondary acute myelomonocytic leukemia (AML FAB-M4) following a 25-year history of myelodysplastic syndrome (MDS).

MUTZ-8 cells exhibit notable scientific characteristics:

1. Factor Dependency: Proliferation strictly requires exogenous cytokines such as GM-CSF.

2. Genetic Profile: Harbors a homozygous $JAK2^{\text{V617F}}$ mutation, a $TP53$ mutation, and a  deletion of 5q31 through a non-reciprocal translocation $\text{t}(5;11)(\text{q21};\text{q10})$.

This line serves as a valuable model for investigating MDS-to-AML disease transformation, JAK/STAT pathway inhibition, 5q- syndrome oncogenesis, and factor-dependent anti-leukemic drug testing.

2. Biological Characteristics

• Taxonomy & Source: Homo sapiens, Peripheral blood (Secondary AML M4 / MDS-derived)

• Biosafety Level: BSL-1 (or BSL-2 per institutional biosafety guidelines)

• Growth Properties: Suspension; round to polymorph cells growing singly or in small clusters

• Cytokine Dependency: Strictly dependent on GM-CSF (10 ng/mL)

• Genetic Features:

  • Mutations: $JAK2^{\text{V617F}}$, $TP53$

  • Cytogenetics: 5q31 deletion, $\text{t}(5;11)(\text{q21};\text{q10})$

• Surface Immunophenotype: CD13(+), CD33(+), CD34(+), HLA-DR(+);CD3(-), CD14(-), CD19(-)

• Primary Applications: JAK2 inhibitor screening, MDS evolution modeling, cytokine receptor signaling research

3. Culture and Handling Protocols

Recommended Growth Medium

• Basal Medium: BioVector® $\alpha$-MEM Medium (with ribonucleosides and deoxyribonucleosides)

• Supplements: 20% heat-inactivated BioVector® Fetal Bovine Serum (FBS) + 1% Penicillin-Streptomycin

• Required Cytokine: Recombinant human GM-CSF (rhGM-CSF, 10 ng/mL). Cytokine starvation results in rapid apoptosis or emergence of factor-independent sub-clones.

• Culture Conditions: 37 degrees Celsius, 5% $\text{CO}_2$, humidified incubator

Thawing and Subculture Protocol

1. Thawing: Thaw rapidly in a 37 degrees Celsius water bath. Resuspend in pre-warmed BioVector® Complete Medium supplemented with rhGM-CSF and centrifuge at 120 x g for 5 minutes. Initial seeding density after thaw should be $\sim 0.8 \times 10^6 \text{ cells/mL}$.

2. Passaging:

   • Maintain cell density between $0.5 \times 10^6 \text{ cells/mL}$ and $1.0 \times 10^6 \text{ cells/mL}$.

   • Subculture 1:2 once or twice weekly by dilution or centrifugation. Doubling time is approximately 3–5 days.

Cryopreservation

• Freezing Medium: 80% BioVector® FBS + 10% DMSO + 10 ng/mL rhGM-CSF

• Storage: Liquid nitrogen (-196 degrees Celsius).

4. Technical Data Summary

BioVector NTCC质粒载体菌株细胞蛋白抗体基因保藏中心

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