ATCC CRL-1721(PC-12) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CRL-1721(PC-12)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-1721(PC-12), PC-12, 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 存储人: B Patterson 种属来源: 大鼠 组织来源: 肾 疾病特征: 肾上腺嗜铬细胞瘤 细胞形态: 多角形 生长特性: 疏松贴壁 培养基: F12K培养基(SIGMA,货号N3520)，85%；热灭活马血清，10%；FBS，5%。 产品目录号: CRL-1721 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 备注: Nucleotide (GenBank) : AF311055 Rattus norvegicus thioredoxin mRNA, complete cds. Nucleotide (GenBank) : AF319950 Rattus norvegicus glutaredoxin mRNA, complete cds. Nucleotide (GenBank) : AF311054 Rattus norvegicus APEX (Apex) mRNA, partial cds, alternatively spliced. 参考文献: Levi A, et al. Molecular cloning of a gene sequence regulated by nerve growth factor. Science 229: 393-395, 1985. PubMed: 3839317 Greene LA, Tischler AS. Establishment of a noradrenergic clonal line of rat adrenal pheochromocytoma cells which respond to nerve growth factor. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 73: 2424-2428, 1976. PubMed: 1065897 Biocca S, et al. A macromolecular structure favouring microtubule assembly in NGF- differentiated pheochromocytoma cells (PC12). EMBO J. 2: 643-648, 1983. PubMed: 6641712 Weber E, et al. Distinct functional properties of Rab3A and Rab3B in PC12 neuroendocrine cells. J. Biol. Chem. 271: 6963-6971, 1996. PubMed: 8636125 NTCC CRL-1721(PC-12)大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞特点和简介 该细胞系来自能移植的雄性大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤。 这些细胞表达神经生长因子(NGF)受体。 NGF可诱导产生神经表型。 这些细胞不合成肾上腺素。 在本库通过支原体检测。 NTCC CRL-1721(PC-12)大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-1721(PC-12)大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-1721(PC-12)大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。