pNC-HisE短芽胞杆菌表达载体Brevibacillus expression plasmid BioVector NTCC中国质粒载体菌种细胞基因保藏中心

pNC-HisE短芽胞杆菌表达载体Brevibacillus expression plasmid BioVector NTCC中国质粒载体菌种细胞基因保藏中心 Brevibacillus (Bacillus brevis ) Expression System是能够高效表达分泌型和优良蛋白质的表达系统，并能生产大量的异源蛋白质。本系统具有如下优点，尤其适用于生产分泌型蛋白质。pNCMO2是Brevibacillus 和E. coli 间的穿梭质粒。在E. coli 中构建表达质粒后，转入Brevibacillus 进行蛋白质表达。 宿主菌细胞壁蛋白质的P2启动子作为pNCMO2的表达启动子，由于P2启动子在E. coli 中不起作用，有利于克隆目的基因；但在Brevibacillus 中则是呈指数级别的强启动子，可有效生产蛋白质。 ·生产大量的胞外分泌型蛋白质； ·无蛋白酶活性； ·生产有活性的蛋白质； ·易于培养和灭菌； ·简单的基因技术； ·安全的宿主菌。 使用本系统，不论是哪种基因起源(细菌，古细菌，真核生物)，各种蛋白质(酶，抗原和细胞因子)都获得了高水平的表达。尤其是真核起源的分泌型蛋白质一般具有S-S键结构，本系统也能进行具有活性的表达，这是使用其他原核表达系统都很难做到的。 构建表达载体时，可以是E.coli 的穿梭载体，也可以是直接将DNA连接液转化到表达宿主中。然后目的蛋白质可通过转化后宿主菌的培养，收集培养上清液获得。不需要细菌匀浆破碎的过程，离心(去除菌细胞)后取上清，然后使用常规技术进行蛋白质的纯化。 pNC-HisT、pNC-HisF、pNC-HisE是Brevibacillus 和E. coli 间的穿梭质粒。在E. coli 中构建表达质粒后，转入Brevibacillus 进行蛋白质表达。 宿主菌细胞壁蛋白质的P2启动子作为pNCMO2的表达启动子，由于P2启动子在E.coli 中不起作用，有利于克隆目的基因；但在Brevibacillus 中则是呈指数级别的强启动子，可有效生产蛋白质。 pNC-HisT的His-Tag位于分泌信号肽和Thrombin切割位点的下游，pNC-HisF的His-Tag位于分泌信号肽和Factor Xa切割位点的下游， pNC-HisE的His-Tag位于分泌信号肽和肠激酶切割位点的下游，以便His-Tag可以从融合表达蛋白质中去除。